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大鼠髓核細胞的原代培養總結會

更新時間:2024-04-25      點擊次數:116

2024年4月18日,周四,公司組織,由實驗室主管劉博主導,實驗室全體成員參與,對大鼠髓核細胞的原代培養相關知識點,進行了培訓與交流。本次會議,主要針對小鼠骨髓源性巨噬細胞的種植模型,劉博就實驗方法深入進行了講解,實驗室人員展開激烈的討論。以下為討論內容的總結:

 

1.脫臼法處死SD大鼠,剃毛,75%酒精浸泡5min。

2.從尾椎處剪開皮膚,取出腰椎。用含2%雙抗的PBS沖洗3-5次。

3.分離椎節,切開纖維環分離凝膠狀髓核,將凝膠狀髓核置于PBS中沖洗3次,去除血跡,剪碎髓核組織呈1mm3大小,移至離心管后加入5倍體積的1.5%Ⅱ型膠原酶,37℃搖床消化2h。

4.消化結束,20%FBS終止消化,100um濾網過濾,1000r/min離心5min,棄上清后DMEM/F12重懸,按1×105/ml接種于培養板,加入含1%雙抗和 15% FBS 的 DMEM/F12,置于37 ℃細胞培養箱中培養。

5.4d后換液,以后每3天換液 1 次,細胞達 90% 融合后傳代。

 

本次會議,提升公司對小鼠骨髓源性巨噬細胞的種植模型的重要知識點的認知,針對相關實驗,更好的把控實驗質量,提高了公司在這方面的經驗積累。


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