HE染色實驗時有哪些需要注意的呢？

　　HE染色實驗，全稱為蘇木精和伊紅染色方法，是病理學染色技術中最基本也是最重要的一種。該方法通過區分細胞核和細胞質的酸堿性特性，將它們分別染成藍色和紅色，從而滿足形態學觀察的需求。

　　蘇木精為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是DNA，DNA的雙螺旋結構中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。

　　細胞漿內主要成分是蛋白質，為兩性化合物。細胞漿的染色與pH值有密切關系。伊紅Y是一種化學合成的酸性染料，在水中離解成帶負電荷的陰離子，與蛋白質的氨基正電荷（陽離子）結合而使細胞漿染色，細胞漿、紅細胞、肌肉、結締組織，嗜伊紅顆料等被感染成不同程度的紅色或粉紅色，與藍色的細胞核形成鮮明的對比。

　　HE染色實驗的注意事項：

　　1、切片制備

　　切片厚度大?。呵衅暮穸群痛笮绊懭旧Ч?，因此需要根據實驗需求選擇合適的切片。

　　固定清洗：將切片放入固定液中以防止組織中的水分蒸發，并保持組織結構的完整性。常用的固定液包括甲醛、乙醇等。之后用清水清洗切片，去除固定液的影響。

　　2、固定清洗

　　樣品制備：對于貼壁生長的細胞，胰酶消化后調整細胞濃度滴加于蓋玻片上，培養相應時間后取出并用PBS洗滌。

　　樣品固定：用95%乙醇固定20分鐘，再用PBS洗滌兩次。

　　3、染色沖洗

　　染核：用蘇木素染液染色2-3分鐘，之后用自來水沖洗。若染色過深，可用1%鹽酸酒精溶液分色，再水洗。

　　染胞質：浸入伊紅染液染色1分鐘，再次用自來水沖洗。

　　4、封固觀察

　　封固：吹干或自然晾干細胞爬片后，使用中性樹膠封片。

　　鏡檢觀察：在顯微鏡下觀察染色效果。若染色不均勻或顏色不鮮明，可能需要調整染色時間和分化時間。